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Abraham Cézar de Brito Rocha

Ciências Agrárias

Medicina Veterinária
  • desenvolvimento e avaliação de proteínas quiméricas para um diagnóstico sorológico rápido da dirofilariose canina.
  • A Dirofilariose canina é uma doença causada pelo verme Dirofilaria immitis que leva a um comprometimento cardiorrespiratório e posterior morte dos animais. Essa parasitose chama atenção da indústria farmacêutica, porque a prevenção anual gira em torno de $75 por cão e existe aproximadamente 80 milhões de cães infectados nos EUA e 54 milhões no Brasil. O padrão ouro do diagnóstico é o teste de detecção de antígeno circulante, porém há limitações em cães com baixa carga parasitária de fêmeas de D. immitis. Somado a isso, não há um teste de captura de anticorpos disponível comercialmente. Diante do exposto, o objetivo é desenvolver e avaliar proteínas quiméricas para o desenvolvimento de um teste rápido de captura de anticorpos para a dirofilariose canina. Primeiro, serão desenhados genes quiméricos (in silico) que reúnam regiões antigênicas de proteínas de D. immitis identificadas como epítopos para linfócitos B. A fim de diminuir a possibilidade de reação cruzada, as sequências similares a outras espécies de parasitas serão excluídas do gene em construção. Os genes serão clonados em vetores de expressão, que serão usados para transformar células competentes de E. coli. A expressão das proteínas quiméricas será estimulada por IPTG e a purificação será feita por cromatografia. Então, as proteínas serão avaliadas por ELISA indireto com soros de cães positivos e negativos para a dirofilariose (de áreas endêmicas e não endêmicas), além de outras parasitoses para avaliar a reação cruzada. Para cada antígeno, serão analisados a sensibilidade, especificidade, o valor preditivo positivo e negativo. Após a identificação da melhor proteína nos resultados do ELISA, será produzido um teste rápido do tipo lateral flow para avaliar o desempenho dessa plataforma e seu futuro uso no diagnóstico da dirofilariose canina. A expectativa é que o novo teste possa contribuir para um maior conhecimento sobre a epidemiologia da doença, direcionando esforços para controlar esta parasitose.
  • Fundação Oswaldo Cruz - PE - Brasil
  • 17/03/2022-31/03/2025